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Waters Styragel色譜柱的溶劑和樣品制備

更新時間:2024-08-19      點(diǎn)擊次數(shù):1207

Waters Styragel色譜柱的溶劑和樣品制備

本章介紹了:

■ 溶劑預(yù)備

■ 溶劑更換

■ 將色譜柱轉(zhuǎn)換至高溫溶劑

■ 樣品制備

 

a. 溶劑預(yù)備

使用清潔的溶劑以獲得可重現(xiàn)的結(jié)果,同時可免去維護(hù)操作。使用LC級或更高級別的溶劑,并過濾除去大于0.45 μm的微粒物質(zhì)。想獲得過濾器選擇和溶劑相容性一覽表,請參閱沃特世耗材指南的過濾器相關(guān)章節(jié)。

 

b. 更換溶劑

溶劑相溶性

Waters Styragel色譜柱的出廠溶劑可由您自選:甲苯、THFDMF。某些應(yīng)用要求采用其它溶劑。溶劑轉(zhuǎn)換時選擇相溶的溶劑能得到最佳效果。請參閱下表了解相溶性溶劑。

                                              image.png

對于高溫色譜,要在三氯苯(TCB)或鄰二氯苯(ODCB)等溶劑條件下使用Waters Styragel色譜柱,必須將色譜柱轉(zhuǎn)換至高溫下所選溶劑。

 

高溫轉(zhuǎn)換步驟

將色譜柱組轉(zhuǎn)換至高溫操作的方法:

1. 在室溫下將系統(tǒng)轉(zhuǎn)換至色譜柱出廠溶劑。

2. 0.1 mL/min的流速沖洗節(jié)約溶劑型色譜柱,同時在至少3小時內(nèi)逐漸將溫度升至90 ℃。

溶劑節(jié)約型色譜柱(以0.1 mL/min的流速沖洗色譜柱,同時在至少3小時內(nèi)逐漸將溫度升至90 ℃。)

 

色譜柱由THF轉(zhuǎn)換為HFIPY-丁內(nèi)酯時,將系統(tǒng)設(shè)置為55 ℃。

3. 在系統(tǒng)處于90 ℃時,以0.1 mL/min流速將其轉(zhuǎn)換至高溫溶劑,每根色譜柱使用12 mL溶劑。然后以0.2 mL/min流速、至少四倍柱體積的溶劑沖洗系統(tǒng)。

使用色譜柱組時,溶劑用量為上述步驟中指定的色譜柱體積乘以使用的色譜柱數(shù)目。

4. 0.1 mL/min的流速轉(zhuǎn)換至高溫溶劑。每根色譜柱使用至少20 mL溶劑。

5. 在至少4小時內(nèi)將溫度升至最終條件,同時繼續(xù)以0.1 mL/min的流速沖洗色譜柱。溫度不得超過150 ℃。

在至少4小時內(nèi)將溫度升至最終條件,同時繼續(xù)以0.1 mL/min的流速沖洗色譜柱。溫度不得超過150 ℃。

6. 將流速調(diào)節(jié)為最終操作條件。最佳流速為0.3 mL/min。

將流速調(diào)節(jié)為最終操作條件。最佳流速為0.3 mL/min

 

返回至室溫

反向執(zhí)行上述步驟可使色譜柱返回至室溫?;蛘撸瑢⒘魉僭O(shè)置為0.1 mL/min,并使溫度每30分鐘降低10 ℃。

 

重啟色譜柱

要重啟色譜柱,將流速維持在0.1 mL/min,并在10小時內(nèi)將溫度升至所需溫度。然后設(shè)置所需的操作流速。

為獲得最長的色譜柱壽命,應(yīng)避免溫度循環(huán)變化。色譜柱未使用時,應(yīng)維持在運(yùn)行溫度,并將流速降低至0.1 mL/min

 

c. 樣品制備

良好的樣品前處理能夠延長色譜柱壽命并確保獲得可重現(xiàn)的結(jié)果。制備樣品時應(yīng)將色譜柱容量、樣品粘度、檢測器類型和靈敏度等因素考慮在內(nèi)。采用0.45 μm過濾器除去微粒。參閱沃特世耗材指南過濾器相關(guān)章節(jié),獲得過濾器選擇和溶劑相容性信息。

 

活性聚合物

某些活性聚合物(例如環(huán)氧聚合物)能“活化"色譜柱。特定類別的活性聚合物能夠延長色譜柱壽命并提高重現(xiàn)性。

 

樣品濃度

樣品濃度對粘度和進(jìn)樣體積均有影響。較小的樣品量能夠得到較窄的色譜峰,但對于粘性樣品可能需要更多用量且稀釋度更高。表2列出了為獲得最佳結(jié)果的推薦樣品濃度。

 

高分子量聚合物

高分子量聚合物尤其容易產(chǎn)生粘度問題。分析高分子量聚合物時,請使用表2所列的濃度。運(yùn)行窄分布聚合物(例如聚苯乙烯標(biāo)準(zhǔn)品)時,每根色譜柱的進(jìn)樣體積為50 μL(對于溶劑高效色譜柱,每根色譜柱的進(jìn)樣體積為20 μL),樣品濃度為0.02%

 

由于溶液剪切作用,分子量為四百萬甚至更高的聚苯乙烯標(biāo)準(zhǔn)品極易發(fā)生降解。剪切效應(yīng)表現(xiàn)為分子量分布寬于預(yù)期值。操作得當(dāng)時,可以成功處理分子量高達(dá)2000萬的聚合物。

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超高分子量聚合物

剪切效應(yīng)也是大多數(shù)超高分子量聚合物所應(yīng)當(dāng)考慮的因素。這些聚合物的剪切效應(yīng)可能不如窄分子量標(biāo)準(zhǔn)品的剪切效應(yīng)那樣容易觀察。超高分子量的聚烯烴餾分易發(fā)生剪切和初始沉淀現(xiàn)象。對于這些餾分,采用極稀的溶液(例如,0.02%)能夠最大限度減少沉淀現(xiàn)象。


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